臺(tái)盼藍(lán)染色液資料詳解
臺(tái)盼藍(lán)染色液概述
臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)是一種細(xì)胞活性染料,化學(xué)式為C??H??N?Na?O??S?,分子量960.805,CAS號(hào)72-57-1,呈藍(lán)灰色粉末狀,溶于水,微溶于乙醇?。其核心功能是通過(guò)染色區(qū)分活細(xì)胞與死細(xì)胞:活細(xì)胞因膜結(jié)構(gòu)完整而拒染,死細(xì)胞因膜通透性增加被染成藍(lán)色?。
主要用途
細(xì)胞活性檢測(cè)?:
用于細(xì)胞培養(yǎng)中存活率評(píng)估,如貼壁細(xì)胞消化后或懸浮細(xì)胞的活力分析?。
病毒檢測(cè)中輔助判斷細(xì)胞感染狀態(tài)?。
活體染色?:
巨噬細(xì)胞吞噬臺(tái)盼藍(lán)后可用于活體染色?。
其他應(yīng)用?:
眼科手術(shù)中前囊染色、角膜內(nèi)皮細(xì)胞質(zhì)量評(píng)估?。
配制與使用方法
母液配制?:
4%臺(tái)盼藍(lán)母液:稱(chēng)取4g臺(tái)盼藍(lán),加少量蒸餾水研磨,定容至100mL,過(guò)濾后4℃保存?。
工作液稀釋?:
使用前用PBS將母液稀釋至0.4%?。
染色步驟?:
細(xì)胞懸液與0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液按9:1混合,終濃度0.04%?。
染色時(shí)間控制在3-10分鐘內(nèi),避免活細(xì)胞因染料積累而誤染?。
結(jié)果觀察?:
顯微鏡下活細(xì)胞透明,死細(xì)胞顯藍(lán)色,通過(guò)血球計(jì)數(shù)板計(jì)算存活率?。
注意事項(xiàng)
安全性?:臺(tái)盼藍(lán)為2B類(lèi)致癌物,操作時(shí)需戴手套,避免接觸皮膚或吸入?。
染色時(shí)間?:超過(guò)10分鐘可能導(dǎo)致活細(xì)胞異常著色,影響結(jié)果準(zhǔn)確性?。
儲(chǔ)存條件?:4℃避光保存,長(zhǎng)期存放可能出現(xiàn)沉淀,37℃水浴可溶解?。
替代方案
若細(xì)胞存活率>80%,可優(yōu)先選擇熒光核酸染料(如PI)以減少假陽(yáng)性?。
注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢(xún)技術(shù)老師。
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