ELISA實驗“避坑”手冊：樣本處理中的關(guān)鍵細節(jié)

　　ELISA實驗“避坑”手冊：樣本處理中的關(guān)鍵細節(jié)
 

　　ELISA實驗中樣本處理是影響結(jié)果準確性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，以下是常見樣本類型的處理要點及避坑指南：
 

　　一、血清樣本處理
 

　　靜置與離心‌：全血需室溫靜置2小時或4℃過夜使細胞沉降，隨后以2000g離心10分鐘獲取上清‌。
 

　　避坑：未離心直接加樣會導致雜質(zhì)干擾，離心后需避免吸到沉淀層。
 

　　儲存條件‌：短期存放建議2-8℃(≤1周)，長期保存需分裝后-20℃(1個月內(nèi))或-80℃(1個月以上)‌。
 

　　二、血漿樣本處理
 

　　抗凝與離心‌：采集后需立即加入抗凝劑(如EDTA)，30分鐘內(nèi)以1000g離心15分鐘‌。
 

　　避坑：抗凝劑選擇不當(如肝素可能干擾檢測)或離心延遲會導致纖維蛋白原殘留。
 

　　凍存注意‌：避免反復凍融，建議分裝后-80℃保存‌。
 

　　三、組織樣本處理
 

　　勻漿方法‌：取100mg組織，用PBS沖洗后研磨或超聲裂解，結(jié)合反復凍融(2次)破壞細胞膜‌。
 

　　避坑：組織塊未充分勻漿會導致目標蛋白釋放不全，影響檢測靈敏度。
 

　　離心參數(shù)‌：低溫離心(4℃)后取上清，避免脂質(zhì)或細胞碎片干擾‌。
 

　　四、通用注意事項
 

　　樣本污染‌：操作需無菌，避免細菌或外源蛋白引入假陽性。
 

　　稀釋優(yōu)化‌：高濃度樣本需預實驗確定稀釋倍數(shù)，確保檢測值在標準曲線范圍內(nèi)。
 

　　凍融控制‌：反復凍融不超過3次，避免蛋白降解‌。
 

　　通過規(guī)范樣本處理流程，可顯著減少假陽性/陰性結(jié)果，提升ELISA數(shù)據(jù)的可靠性‌。
 

　　注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。
 

　　天津天正信達供應：RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實驗耗材，我司擁有一支覆蓋生物化學、分子生物學、免疫學等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設備齊全的實驗技術(shù)平臺，主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機、全波長酶標儀、高速落地離心機和qPCR儀等大型儀器設備。