ELISA實驗:酶聯免疫吸附測定原理與應用方向
ELISA的原理和應用方向其實很清晰,核心是利用抗原抗體的特異性結合和酶的高效催化來實現高靈敏度的檢測。下面天正信達幫你梳理一下:
一、ELISA基本原理
固相化?:將抗原或抗體固定在固相載體(如微孔板)表面,保持其免疫活性。
酶標記?:將另一種抗體或抗原與酶(如辣根過氧化物酶HRP)連接,形成酶標復合物,該復合物同時保留免疫活性和酶活性。
特異性結合?:加入待測樣本,樣本中的目標物(抗原或抗體)與固相載體或酶標復合物發生特異性結合。
洗滌分離?:洗去未結合的物質,只留下特異性結合的復合物。
酶促顯色?:加入酶的底物,酶催化底物產生有色產物,顏色深淺與樣本中目標物濃度成正比。
定量檢測?:用分光光度計測定顏色強度,通過標準曲線計算樣本中目標物的精確濃度。
二、ELISA應用方向
ELISA應用廣泛,主要包括:
疾病診斷?:檢測病原體或其抗體。
疾病監測與普查?:大規模篩查疾病或檢測人群免疫水平。
法醫與獸醫檢測?:用于毒物檢測、動物疫病診斷等。
農業與植物病理學?:檢測植物病原體或轉基因成分。
科研與藥物開發?:定量檢測細胞因子、激素、藥物等生物分子。
三、ELISA主要類型
間接法?:檢測抗體。抗原包被固相板,加入待測抗體,再用酶標二抗檢測。
夾心法?:檢測大分子抗原。先包被捕獲抗體,加入樣本,再用酶標檢測抗體。
競爭法?:檢測小分子抗原或半抗原。樣本抗原與酶標抗原競爭結合固相抗體。
注意:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
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