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      人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)Elisa試劑盒實驗說明書

      發表時間:2025/7/1  |  點擊率:168
       
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        人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)Elisa試劑盒實驗說明書

        以下是關于人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒的實驗說明書,結合檢測原理、操作步驟及注意事項進行詳細說明:

        BS-0327 人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒

        一、?檢測原理?

        采用?雙抗體夾心法?或?競爭法?(不同品牌可能差異):

        夾心法?:包被抗體捕獲樣本中的8-OHdG,再與酶標抗體結合形成復合物,通過底物顯色(TMB)測定吸光度(OD值),濃度與顏色深度正相關?。

        競爭法?:樣本中的8-OHdG與生物素標記抗原競爭結合固相抗體,OD值與濃度負相關?。

        二、?試劑盒組成?

        組分? ?說明?

        預包被微孔板? 12孔×8條,含抗8-OHdG抗體?。

        標準品? 濃度梯度(如0-4000pg/ml或0-200ng/L),需按說明書稀釋?。

        酶標試劑/檢測抗體? HRP標記抗體,避光保存?。

        洗滌液? 30倍濃縮,需稀釋后使用?。

        顯色液(TMB)? A液(H?O?)與B液(TMB)需等體積混合?。

        終止液? 2N H?SO?,顯色后終止反應?。

        三、?樣本處理要求?

        血清/血漿?:離心(3000rpm, 10分鐘)去除顆粒,避免溶血或反復凍融?。

        細胞上清/組織勻漿?:離心后取上清,分裝保存于-20℃?。

        禁用NaN3?:會抑制HRP酶活性?。

        四、?操作步驟?

        標準品稀釋?:按說明書梯度稀釋(如4000→62.5pg/ml),設復孔?。

        加樣?:每孔加標準品或樣本100μl,37℃孵育120分鐘?。

        洗滌?:拍干后加洗滌液浸泡1-2分鐘,重復4-6次?。

        顯色?:加TMB工作液100μl,37℃避光反應15-30分鐘?。

        終止與檢測?:加終止液50μl,30分鐘內測450nm OD值?。

        五、?結果計算?

        以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,計算樣本濃度?。

        靈敏度?:檢測限通常為30-45.8pg/ml?。

        重復性?:板內/板間變異系數<10%?。

        六、?注意事項?

        質量控制?:每次實驗需做標準曲線及空白對照?。

        密封保存?:開封板條需干燥密封,避免受潮?。

        溫度控制?:試劑盒保存于2-8℃,避免凍存酶標試劑?。

        僅限科研?:不可用于臨床診斷?。

        以上步驟需嚴格遵循試劑盒說明書,不同品牌可能存在細節差異?。

        注:以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師或品牌供應商。

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