大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理主要基于?雙抗體夾心法?，通過(guò)特異性抗體捕獲目標(biāo)蛋白并顯色定量。以下是詳細(xì)解析： 一、核心檢測(cè)原理 抗體包被? 試劑盒預(yù)包被抗Ki-67蛋白的單克隆抗體于酶標(biāo)板微孔中，形成固相捕獲層?。 抗原-抗體結(jié)合? 樣本或標(biāo)準(zhǔn)品中的Ki-67蛋白與包被抗體特異性結(jié)合，形成“抗體-抗原"復(fù)合物?。 信號(hào)放大? 加入生物素標(biāo)記的二抗(抗Ki-67多克隆抗體)，與已結(jié)合的抗原形成“抗體-抗原-二抗"復(fù)合物?。 通過(guò)鏈霉親和素-生物素-過(guò)氧化物酶(SA-ABC)系統(tǒng)進(jìn)一步放大信號(hào)?。 顯色與定量? 加入TMB顯色底物后，酶催化反應(yīng)生成藍(lán)色產(chǎn)物，終止液變黃，在450nm波長(zhǎng)下檢測(cè)吸光度(OD值)，Ki-67濃度與OD值呈正比?。 二、關(guān)鍵組分與流程 試劑盒組分?：包被抗體、生物素化二抗、SA-ABC復(fù)合物、TMB底物、終止液等?。 操作步驟?： 樣本稀釋與加樣 37℃孵育(通常1小時(shí)) 洗滌去除未結(jié)合物質(zhì) 加入二抗與SA-ABC復(fù)合物 顯色反應(yīng)后終止并讀數(shù) 三、技術(shù)特點(diǎn) 高特異性?：雙抗體夾心法可減少交叉反應(yīng)，提高檢測(cè)準(zhǔn)確性?。 靈敏度?：檢測(cè)范圍通常為0.312-20ng/mL，適用于低豐度蛋白檢測(cè)?。 標(biāo)準(zhǔn)化?：需通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度，確保結(jié)果可比性?。 四、注意事項(xiàng) 樣本處理?：避免反復(fù)凍融，建議使用新鮮組織或血清樣本?。 干擾因素?：高濃度內(nèi)源性生物素或異嗜性抗體可能影響結(jié)果，需通過(guò)稀釋或阻斷劑處理?。 如需進(jìn)一步了解Ki-67的生物學(xué)功能或臨床意義，可參考免疫組化檢測(cè)的相關(guān)研究?。 注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產(chǎn)品說(shuō)明請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。 天津天正信達(dá)供應(yīng)：RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進(jìn)樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實(shí)驗(yàn)耗材，我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)，主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機(jī)、全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀、高速落地離心機(jī)和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。 | 
