大鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 BS-3378 大鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 一:實(shí)驗(yàn)原理 大鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理基于?雙抗體夾心法?的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù),其核心步驟如下: 1. ?包被抗體固定? 捕獲抗體(包被抗體)預(yù)先包被在微孔板表面,與樣本中的目標(biāo)蛋白(GHRP)特異性結(jié)合?。 2. ?樣本孵育與結(jié)合? 加入待測(cè)樣本(如大鼠血清、血漿等),目標(biāo)蛋白與包被抗體形成“抗原-抗體"復(fù)合物?。 3. ?酶標(biāo)抗體顯色? 加入酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體,與目標(biāo) 蛋白的另一表位結(jié)合,形成“夾心"結(jié)構(gòu)。隨后加入底物(如TMB),在酶催化下顯色,顏色深淺與目標(biāo)蛋白濃度成正比?。 4. ?終止與檢測(cè)? 加入終止液終止反應(yīng),通過(guò)酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中GHRP的濃度?。  關(guān)鍵特性 靈敏度?:依賴抗體配對(duì)的特異性,通常可檢測(cè)pg/mL級(jí)濃度?。 樣本類型?:適用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等?。 標(biāo)準(zhǔn)化?:需通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品建立濃度-信號(hào)曲線,確保定量準(zhǔn)確性?。 三、操作流程 樣本前處理 血清/血漿:離心后取上清,1:5稀釋(避免溶血樣本)。 組織勻漿:PBS研磨后離心,取上清檢測(cè)。 檢測(cè)步驟 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋(0/5/20/50/100 pg/mL)。 每孔加100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本,37℃孵育90分鐘。 洗滌后加100μL生物素二抗,37℃孵育30分鐘。 加100μL HRP-鏈霉親和素,避光孵育20分鐘。 顯色10分鐘,加終止液后30分鐘內(nèi)讀450nm。 數(shù)據(jù)分析 標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合:四參數(shù)邏輯回歸(4PL)。 樣本濃度=標(biāo)準(zhǔn)曲線值×稀釋倍數(shù)。 注意:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒 天津天正信達(dá)供應(yīng):RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進(jìn)樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實(shí)驗(yàn)耗材,我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái),主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機(jī)、全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀、高速落地離心機(jī)和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。 |