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      ELISA樣本制備及注意事項

      更新時間:2025-08-08  |  點擊率:555

        

        以下是ELISA樣本制備的關鍵步驟及注意事項,綜合實驗規范與常見問題:

        一、樣本類型處理要點?

        血清制備?

        采集后室溫靜置1小時(凝血),4℃ 2500rpm離心10分鐘取上清

        避免溶血(血紅素干擾HRP顯色)和細菌污染

        血漿處理?

        使用EDTA抗凝管采集,30分鐘內4℃離心分離

        肝素抗凝劑可能干擾檢測,需參照試劑盒要求選擇

        細胞培養上清?

        1500rpm離心10分鐘去除細胞碎片,分裝后-80℃保存

        尿液/腦脊液?

        10000×g離心2分鐘,去除沉淀物后檢測

        二、保存與凍存規范?

        樣本類型? ?短期保存? ?長期保存? ?禁忌?

        血清/血漿 2-8℃ 48小時 -80℃(6個月) 反復凍融>3次

        細胞上清 4℃ 24小時 -80℃(分裝) 室溫放置>30分鐘

        三、關鍵注意事項?

        防污染措施?

        使用無菌離心管,操作全程在冰上進行(除凝血步驟)

        細菌污染樣本需離心后取上清重新檢測

        離心參數控制?

        血清/血漿:2500-3000rpm,10分鐘

        細胞裂解物:12000-13000rpm,5-10分鐘

        特殊樣本處理?

        高脂血樣本需超速離心(10000×g 15分鐘)

        四、常見問題解決方案?

        假陽性高?:檢查溶血/脂血情況,更換抗凝劑類型

        重復性差?:確保分裝凍存,避免凍融循環

        濃度異常?:預實驗確定樣本稀釋倍數(建議1:5-1:10)

        通過規范操作可顯著提升檢測準確性。

        注:以上資料僅供參考,不同品牌產品可能存在設計差異,操作前建議參考說明書?。

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