人層粘連蛋白α3(lama3)ELISA試劑盒實驗使用說明書 以下是為您整理的人層粘連蛋白α3(LAMA3)ELISA試劑盒實驗使用說明書核心內容: 一、實驗原理? 采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附技術(ELISA)。預包被抗LAMA3抗體的微孔板中依次加入樣本、標準品及HRP標記檢測抗體,形成抗體-抗原-抗體復合物。TMB顯色后,450nm波長測定吸光度,濃度與OD值呈正相關?。 二、試劑盒組成? 組分 規格(96T) 保存條件 預包被抗LAMA3抗體微孔板 12×8條 2-8℃ 重組LAMA3標準品 10ng/管×2管 -20℃凍存 生物素標記檢測抗體 100μL(100×) 避光 親和素-HRP復合物 100μL(100×) 避光 TMB顯色液 A/B各10mL 2-8℃避光 20×洗滌緩沖液 20mL 室溫 注:具體配置以實際產品批號說明書為準?。 三、樣本處理? 血清/血漿?:室溫靜置2h后離心(1000×g, 15min),取上清檢測。 組織勻漿?:PBS沖洗后冰上研磨,超聲破碎后5000×g離心5min取上清。 細胞培養上清?:直接離心(1000×g, 10min)去除雜質。 禁忌:溶血或反復凍融樣本需棄用?。 四、操作流程? 平衡?:試劑盒室溫平衡30min。 加樣?:標準品/樣本各100μL,空白孔加稀釋液。 孵育?:37℃ 90min→洗滌3次(每次30s)。 顯色?:避光加入TMB,37℃ 15min→終止液終止。 檢測?:450nm測定OD值,600nm校正?。 五、注意事項? 移液精度?:使用校準移液槍(誤差≤2%),避免交叉污染?。 溫度控制?:試劑需平衡至室溫,禁止水浴加熱?。 避光操作?:TMB顯色全程避光,孵育時覆蓋酶標板?。 批次一致性?:不同批次試劑不可混用?。 注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產品說明請咨詢技術老師或品牌供應商。 |