miRNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(莖環(huán)法）miRNA qPCR Kit miRNA熒光定量PCR試劑盒 天津天正信達(dá)供應(yīng)EzRed™ 核酸染料是一種超靈敏、極其穩(wěn)定且對(duì)環(huán)境安全的熒光核酸染料，可替代劇毒的溴化乙錠 (EB)，EzRed™ 核酸染料是一種的油性大分子，不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

     miRNA鏈cDNA合成試劑盒是采用莖環(huán)法原理的專用試劑盒， 5×Reaction Mix為一管式反轉(zhuǎn)錄預(yù)混液，含有反轉(zhuǎn)錄所需的所有試劑（反轉(zhuǎn)錄酶、RNase Inhibitor、dNTPs、Buffer），只需加入模板RNA和莖環(huán)引物即可進(jìn)行反應(yīng)，使得cDNA的合成更加的方便快捷。

     本試劑盒中使用了具有DNA分解活性的特殊gDNA Remover，不需要中途開蓋添加，只需一步操作，即可同時(shí)完成基因組清除與逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，大大的簡(jiǎn)化了操作步驟，避免了繁雜的加樣過程對(duì)樣品造成的污染和RNA的降解。本試劑盒的反轉(zhuǎn)錄酶具有的熱穩(wěn)定性，經(jīng)過特別優(yōu)化的緩沖體系，限度保證各種miRNA特異性逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的合成。同時(shí)產(chǎn)物cDNA的兼容性好，可以適配市面上主流的熒光定量mix做下游檢測(cè)試驗(yàn)。

miRNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(莖環(huán)法）

產(chǎn)品組分

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃保存，有效期1年。

注意事項(xiàng)

1）盡量避免RNase對(duì)樣品的污染；

2）為保證逆轉(zhuǎn)錄的成功，請(qǐng)盡量獲得高質(zhì)量的RNA樣品；

3）5×Reaction mix和gDNA Remover含有甘油，比較粘稠，溶液易掛壁和吸附在移液槍頭外導(dǎo)致產(chǎn)品損耗，因此，在使用前請(qǐng)點(diǎn)甩離心后使用，同時(shí)使用低吸附移液槍頭；

4）5×Reaction mix和gDNA Remover所包含的酶均足夠量。即使每次5×Reaction mix只用3.6μl或0.8μL的gDNA Remover都不會(huì)對(duì)使用效果造成影響。

5）本產(chǎn)品僅作科研用途！

使用方法

一、莖環(huán)法miRNA鏈cDNA合成(以20 μl反應(yīng)體系為例，可使用10μL體系)

1.使用前將每種溶液輕彈或者輕微渦旋振蕩混勻，可簡(jiǎn)短離心以收集殘留在管壁的液體到管底。

2.在無RNase管里面加入以下成分：(建議使用PCR管冰上配制，置PCR儀反應(yīng))

* 在反應(yīng)中使用的total miRNA 必須包含有小分子RNA(miRNA)。此過程也可以使用富集的miRNA， 單miRNA無法直接用分光光度計(jì)定量，建議直接加入2μl ~5μl。可根據(jù)目的miRNA豐度決定加入量，但是對(duì)于低豐miRNA 樣品而言(如血清血漿提取物)，可直接加入體積8 μl。