BCA蛋白濃度測定試劑盒（即用型）天津天正信達供應(yīng) 核酸染料是一種超靈敏、極其穩(wěn)定且對環(huán)境安全的熒光核酸染料，可替代劇毒的溴化乙錠 (EB)，核酸染料是一種的油性大分子，不能穿透細胞膜進入細胞內(nèi)。

更新時間：2025-03-24

產(chǎn)品型號：HRX0119

所在城市：天津市

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

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BCA蛋白濃度測定試劑盒（即用型） 產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品編號	規(guī)格	價格（元）
BCA Protein Assay Kit (BCA蛋白濃度測定試劑盒)	HRX0119	500T	288
BCA Protein Assay Kit (BCA蛋白濃度測定試劑盒)	HRX0120	2500T	818

產(chǎn)品描述

本產(chǎn)品是一種即用型的總蛋白濃度測定試劑盒，由一系列確定濃度的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液組成。BCA試劑盒可通過測量562nm處的吸光度并與蛋白標(biāo)準(zhǔn)物的吸光度-濃度曲線進行比較，快速測定總蛋白濃度。蛋白質(zhì)定量過程可以在45分鐘內(nèi)完成。
該產(chǎn)品基于BCA (Bicin -choninic Acid) 法研制而成，實現(xiàn)了對蛋白質(zhì)進行快速、穩(wěn)定、靈敏的濃度測定。其原理是在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)分子中的肽鏈結(jié)構(gòu)能與Cu²⁺絡(luò)合生成絡(luò)合物。同時將Cu²⁺還原成Cu⁺。該測定法的紫色反應(yīng)產(chǎn)物是由兩個BCA分子與一個亞銅離子螯合形成的。這種水溶性復(fù)合物在562nm處表現(xiàn)出很強的吸光度，在較寬的工作范圍 (20-2,000μg/ ml) 中，隨著蛋白質(zhì)濃度的增加，吸光度幾乎呈線性。
BCA方法不是真正的端點方法，也就是說最終顏色會繼續(xù)變化。但是孵育后顏色變化的速度足夠慢可以允許分析大量的樣品。據(jù)報道蛋白質(zhì)的大分子結(jié)構(gòu)，肽鍵的數(shù)量以及四種特定氨基酸 (半g氨酸、g氨酸、s氨酸和l氨酸) 的存在與BCA的顏色形成有關(guān)。對二肽、三肽和四肽的研究表明顏色形成的程度不僅僅是由單個產(chǎn)生顏色的官能團的總和引起的。
因此通常參考諸如牛血清白蛋白 (BSA) 的常見蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)來確定待測蛋白質(zhì)濃度。一系列確定濃度的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液與待測物一起進行測定，然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線確定每個待測物的濃度。如果需要精確定量待測蛋白質(zhì)，建議選擇質(zhì)量與待測蛋白質(zhì)相似的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品。例如在測定免疫球蛋白樣品時，可以使用牛γ球蛋白 (BGG) 標(biāo)準(zhǔn)品。在介紹的兩種檢測法中，其中試管檢測法需要更大體積 (0.1mL) 的蛋白質(zhì)樣品，但是由于它使用的樣品與工作試劑之比為1:20 (v / v)，因此干擾物質(zhì)的影響降至低。

產(chǎn)品特性

組分	500 tests	2500 tests
BCA Reagent A	100 mL	500 mL
BCA Reagent B	3 mL	5 mL × 3
BSA 標(biāo)準(zhǔn)品①（0 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 標(biāo)準(zhǔn)品②（25 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 標(biāo)準(zhǔn)品③（125 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 標(biāo)準(zhǔn)品④（250 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 標(biāo)準(zhǔn)品⑤（500 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 標(biāo)準(zhǔn)品⑥（750 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 標(biāo)準(zhǔn)品⑦（1000 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 標(biāo)準(zhǔn)品⑧（1500 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5
BSA 標(biāo)準(zhǔn)品⑨（2000 μg/mL）	1 mL	1 mL × 5

使用方法

A.試管配制

1.以50:1的比例混合BCA試劑A和BCA試劑B。即將50ml BCA試劑A與1ml BCA試劑B混合。
注意: 使用以下公式確定所需工作試劑的總量： (標(biāo)準(zhǔn)品+待測樣品) x (重復(fù)次數(shù)) x (每個樣品所需要的BCA工作液) =所需BCA工作液總體積。
2.將100μL每種標(biāo)準(zhǔn)品和待測蛋白質(zhì)分別添加到單獨的標(biāo)記好的試管中，如表1。

表1：白蛋白(BSA)標(biāo)準(zhǔn)品

孔編號	A	B	C	D	E	F	G	H	I
添加物	標(biāo)準(zhǔn)品①	標(biāo)準(zhǔn)品②	標(biāo)準(zhǔn)品③	標(biāo)準(zhǔn)品④	標(biāo)準(zhǔn)品⑤	標(biāo)準(zhǔn)品⑥	標(biāo)準(zhǔn)品⑦	標(biāo)準(zhǔn)品⑧	標(biāo)準(zhǔn)品⑨
體積（μL）	100	100	100	100	100	100	100	100	100
BSA終濃度（μg/mL）	0	25	125	250	500	750	1000	1500	2000

3.在每個試管中加入2 ml BCA工作試劑并充分混合。
4.在37°C下孵育30分鐘。
注意：增加孵育時間和溫度會增加每次測試的凈562 nm吸光度, 并同時降低試劑盒的低檢測水平和試范圍.
5.將所有管子冷卻到室溫(RT)。
6.將分光光度計的波長設(shè)置為OD 562nm。用水將儀器校準(zhǔn)為零。隨后在10分鐘內(nèi)測量所有樣品的吸光度。
注意: 即使冷卻至室溫后，色彩仍會繼續(xù)顯影。但是，如果所有吸光度測量均在10分鐘內(nèi)進行，則隨后在RT處的顯影太弱而不會產(chǎn)生明顯的誤差。
7.從所有讀數(shù)中減去空白的OD562。
8.繪制BSA標(biāo)準(zhǔn)曲線: OD562 (Y軸) vs BSA標(biāo)準(zhǔn)濃度 (X軸)。使用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定每個待測樣品的蛋白質(zhì)濃度。

BCA蛋白濃度測定試劑盒（即用型） 天津天正信達供應(yīng)：RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒、提取試劑盒、色譜進樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實驗耗材，我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實驗技術(shù)平臺，主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機、全波長酶標(biāo)儀、高速落地離心機和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。

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